以Masson染色为例进行说明
一、实验原理
凡是间叶组织细胞都可产生网织纤维,也可产生胶原纤维,纤维母细胞是产生胶原纤维的主要细胞。胶原纤维是结缔组织中的主要纤维,是结缔组织中起支持作用的重要部分,具有一定的韧性和坚固性,能抵抗一定的牵引力而不致撕裂。胶原纤维是原胶原互相错开1/4平行排列交联成胶原原纤维,胶原原纤维再聚合成较宽的结构。按胶原的化学成分可分为15种,间质中的胶原纤维主要由I、Ⅱ、Ⅲ型胶原组成,新鲜时呈白色,故又称为白纤维。在HE染色中呈均一的粉红色,与周围间质区分不是很清楚。染色后,便可明显区别开来,易于观察病变时胶原纤维的变化。
为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括:胶原纤维染色(Masson等)、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色(磷钨酸苏木素)、脂肪染色(苏丹III)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。
Masson三色染色:胶原纤维蓝色(苯胺蓝复染)或绿色(亮绿复染),肌纤维、纤维素红色,红细胞呈橘红色。
应用:
1) 器官硬化性疾病的观察:如肝硬变、心肌瘢痕的观察,胶原染色更易于观察诊断。
2) 瘢痕与淀粉样物质鉴别:前者胶原纤维染色为阳性,后者为阴性。
3) 骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别:利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱,纵横交错,后者较规则。
五、案例展示
六、 常见问题
1、染色易脱片
① 组织本身破碎或过硬等,用防脱载玻片解决;
② 脱水、透明不足,重新脱水透明浸蜡;
③ 脱水、透明过度,用酒精甘油各半浸泡切面后再切片。
④ 切片过厚,厚薄均匀切片。
2、切片染色不均
① 取材固定不当,取材规范标准,固定彻底;
② 脱水不够,重新脱水、透明、浸蜡。
3、切片染色模糊不清
① 包埋蜡温度过高;
② 分化过度;
③ 脱水透明不彻底。
七、服务流程